摘要:比較6種生長在不同樹種上的桑黃子實體多糖、黃酮及總三萜含量。結果表明,不同樹種桑黃子實體有效成分含量差異較大,桑樹桑黃子實體多糖、黃酮及三萜含量均高于其他樹種,分別為3.84%、5.12%和2.2%;暴馬丁香樹桑黃子實體多糖含量最低為1.35%,白樺樹桑黃子實體黃酮、總三萜含量均最低,分別為0.68%、0.32%。
桑黃是一類具有重要藥用價值的大型真菌,為擔子菌亞門(Basidiomycotina)層菌綱(Hymenomycetes)多孔菌目(Polyporales)多層孔菌科(Hymenochaetacae)針層孔菌屬(Phellinus)。主要生長于楊、松、桑、白樺、暴馬丁香、杜鵑等樹的樹干上,造成心材白腐,多年生,東北各原始森林較常見(備注:主產地在西南地區)。
桑黃最早收載于李時珍《本草綱目》中,又稱為桑臣、桑耳、胡孫眼、桑黃菇。民間用于治血崩、血淋、脫肛瀉血、帶下、經閉、脾虛泄瀉等[1]?,F代藥理學研究證明,桑黃具有抑制腫瘤、保護肝臟、提高免疫力等多方面藥用功能[2],是目前國際公認的抗腫瘤效果最好的藥用真菌[3]。桑黃的有效成分主要有多糖、黃酮和三萜類物質[4],因其所生長樹種的不同,在有效成分含量上也存在著差異。故本實驗對6種生長在不同樹種上的桑黃子實體的有效成分進行初步研究,旨在為深入開發利用這一珍貴的藥用菌資源,發揮其藥用價值和經濟價值。
1 材料與方法
1.1材料:6種不同樹種的桑黃子實體分別為桑樹桑黃、暴馬丁香樹桑黃、黑樺樹桑黃、楊樹桑黃、松樹桑黃、白樺樹桑黃,均由長白山特產銷售公司提供。
1.2試劑:蘆丁、熊果酸(均為標準品) 美國sigma公司;無 水乙醇、硫酸、苯酚、葡萄糖、硝酸鋁、亞硝酸鈉、 冰乙酸、香革醛、高氯酸(均為分析純)。
1.3儀器與設備: RE-522AA型旋轉蒸發儀 卜海啞榮生化儀器廠; LGJ-18S型冷凍干燥機 北京松源華興有限公司;TU-1901犁雙光束紫外.可見分光光度計 北京昔析通用儀 器有限公司;GL-21M高速冷凍離心機 湘儀離心機公 司;DHG-9070A型電熱鼓風干燥箱 上海一恒科技有限公司。
1.4方法
1.4.1樣品前處理:桑黃子實體在60℃條件下烘干至恒重,粉碎后過60目篩備用。
1.4.2多糖的提取:分別稱取5g子實體粉末加150ml蒸餾水混合均勻, 90℃回流提取,其間經常攪拌,3h后取出,冷卻, 6000r/min離心15min,取上清液,沉淀部分再重復提取 兩次,合并上清液,旋轉真空濃縮至原體積的1/10, 加無水乙醇至終體積分數80%,靜置過夜,收集沉淀: 無水乙醇、內酮洗滌,冷凍干燥,得粗多糖粉末。
1.4.3黃酮的提取:分別稱?。礸子實體粉末加體積分數70%乙醇溶液70ml,50℃回流提?。创?,合并上清液,抽濾去除雜 質,旋轉真空濃縮,回收乙醇,冷凍干燥,得黃酮提 取物粉末。
1.4.4三萜的提取:分別稱取:5g子實體粉末,加入50ml無水乙醇, 80℃回流提取3次,合并上清液,抽濾去除雜質,旋轉 真空濃縮,回收乙醇,冷凍干燥,得三萜提取物粉末。
1.5 測定指標
1.5.1多糖含量測定:取一定量干燥后的粗多糖,用蒸餾水定容至一定體積,采用苯酚.硫酸法[5]測定多糖含量,以葡萄糖為標 準品繪制標準曲線。
1.5.2黃酮含量測定:取一定量干燥后的黃酮提取物,用甲醇溶解并定容 至一定體積,采用NaNO2-A1(NO3)比色法[6]測定黃酮的含 量,以蘆丁為標準品繪制標準曲線。
1.5.3總三萜含量測定:取一定量干燥后的三萜提取物,用乙酸乙酯定容至一定體積,采用冰乙酸.香草醛分光光度法[7]測定總三萜 的含量,以熊果酸為標準品繪制標準曲線。
2結果與分析
2.1 6種不同樹種桑黃子實體中多糖含量
桑樹桑黃、暴馬丁香桑黃、黑樺桑黃、楊樹桑黃、松樹桑黃、白樺桑黃多糖含量分別為3.84% 1.35% 2.47% 2.89% 2.04% 3.16%,其中桑樹桑黃子實體多糖含量最高為3.84%,從高至低依次為白樺、楊樹、黑樺和松樹桑黃子實體,暴馬丁香樹桑黃子實體多糖含最最低為1.35%。
2.2 6種不同樹種桑黃子實體中黃酮含量
桑樹桑黃、暴馬丁香桑黃、黑樺桑黃、楊樹桑黃、松樹桑黃、白樺桑黃黃酮含量分別為5.12% 1.32% 1.1% 2.7% 1.08% 0.68%,桑樹桑黃子實體黃酮含最高達 5.12%,明顯高于其他樹種桑黃子實體,楊樹桑黃子實 體黃酮含量2.7%,白樺樹桑黃子實體黃酮含量最低僅為0.68%。
2.3 6種不同樹種桑黃子實體中總三萜含量
桑樹桑黃、暴馬丁香桑黃、黑樺桑黃、楊樹桑黃、松樹桑黃、白樺桑黃總三萜含量分別為2.2% 1.01% 0.88% 0.94% 0.96% 0.32%。在總三萜含量的比較上,仍然是桑樹桑黃子實體含鼉最高達2.2%,暴馬丁香、松樹、 楊樹及黑樺樹桑黃予實體總三萜含最相差不大,只有白樺樹桑黃子實體總三萜含最很低僅為0.32%。
2.4 6種不同樹種桑黃子實體有效成分含量的綜合比較
綜合比較6種不同樹種桑黃子實體中多糖、黃酮和 總三萜含量發現,不同樹種桑黃子實體中有效成分含量 存在較大差異。桑樹桑黃子實體多糖、黃酮及總三萜含囂均高于其他樹種桑黃子實體。其中,桑樹桑黃子實體多糖含最是白樺樹桑黃的1.22倍,是暴馬丁香樹桑黃多糖含量的2.84倍;桑樹桑黃子實體黃酮含量是楊樹桑黃子實體的1.9倍,是白樺樹桑黃子實體的7.53倍;桑樹桑黃子實體中三萜含量是暴馬丁香樹、黑樺、楊樹、松樹桑黃子實體的兩倍多,是白樺樹桑黃子實體的6.89倍;楊樹桑黃子實體總三萜含量與暴馬 丁香、黑樺和松樹桑黃子實體接近,但多糖和黃酮含量高于暴馬丁香、黑樺和松樹桑黃子實體,尤其是黃酮含景是暴馬丁香樹桑黃的2.25倍,是黑樺樹桑黃的2.45倍,是松樹桑黃的2.5倍。不同樹種桑黃子實體中多糖、黃酮和總三萜含量無相關性,白樺樹桑黃子實體多糖含量僅次于桑樹桑黃子實體為3.16%,是暴馬丁香樹桑黃的2.1倍,但黃酮和總三萜含量卻最低,僅為桑樹桑黃的12.8%和14.5%,是暴馬丁香樹桑黃的52%和32%。
3 討論與結論
3.1桑黃種質
目前,學術界對桑黃種質還沒有定論,說法也不統一,但所述桑黃均屬于針層孔菌屬(Phellinus spp.)。 國內有關桑黃的文獻報道中出現的拉丁文學名主要有Phellinus igniarius,Phellinus linteus和Phellinus buumii三種。最近,潘學仁等…提出了將尤地針層孔菌(Phellinus yucatanensis)作為真正的桑黃,稱桑樹桑黃。本實驗選取了生長在長白山地區比較常見的6種不 同樹種的桑黃子實體,進行了多糖、黃酮及總三萜含量的比較研究。結果發現,桑樹桑黃子實體多糖、黃 酮及總三萜含最均高于其他樹種桑黃,這也許是桑樹桑黃的價格遠遠高于其他桑黃的原因,也與桑樹桑黃為真正桑黃的說法相一致,但本實驗中的桑樹桑黃是否就是潘學仁等[8]提出的尤地針層孔菌沒有進行比對鑒定工作。 因此,認為在人們對桑黃藥用功效等方面的研究工作不斷取得進展的同時,應加大對桑黃種屬的鑒定工作。
3.2不同樹種桑黃子實體有效成分含量
在不同樹種的桑黃子實體中,其有效成分含量受桑 黃所生樹種、生長環境及提取測定方法等閃素的影響較 大。本實驗比較了桑樹、暴馬丁香、黑樺、楊樹、 松樹和白樺樹6種樹種的桑黃子實體中有效成分的含 量,其中桑樹桑黃子實體多糖、黃酮及總三萜含鼉均 最高,分別為3.84%、5.12%和2.2%;而多糖含量僅次于桑樹桑黃的白樺樹桑黃子實體,多糖含量為3.16%,黃酮和三萜含量卻最低,只有0.68%和0.32%;另外, 在不同樹種桑黃子實體多糖含最的比較結果中,桑樹桑黃子實體多糖含量為3.84%,白樺樹桑黃為3.16%,松 樹桑黃為2.04%,與徐雙陽[9]報道的桑樹桑黃2.7%、白樺樹桑黃2.5%、松樹桑黃4.24%的研究結果不同,可能與原料來源及生長環境等岡素有關。此外,本實驗所得結果反映的是桑黃子實體中粗多糖、黃酮類和總三萜的總量水平值,應進一步分離純化其有效成分并在其生物活性功效方面進行研究,為桑黃藥用產品的開發提供依據。
參考文獻:
[1]劉波.中國藥用真菌[M].太原:山西人民出版社,1974:71-72.
[2]封存山,碼海樂.桑黃及其藥理作用研究進展[J].食用菌,2005,27(2):50-51.
[3]溫克,陳勁,李紅,等.桑黃等四種抗癌藥物抗癌活性比較[J].吉林大學學報:醫學版,2002,28(3):247-249.
[4]鄭立軍,于清,季俊虬,等.藥用真菌桑黃的研究進展[J].現代中藥研究與實驗,2005,19(3):60-64.
[5]張惟杰.糖復合物生化研究技術[M].杭州:浙江大學出版社。1994:13-14.
[6]何照范,張迪清.保健食品化學及其檢測技術[M].北京:中國輕工業出版社。1996:125-128.
[7]江紹琳,江紹玫,曾令聰.分光光度法快速測定靈芝中總三萜含量.江西農業大學學報,2006,28(4):634-636.
[8]潘學仁,鄒利,戶巖巖,等.東亞地區“桑黃”物種問題討論[J]. 中國食用菌。2008,27(1):65-67.
[9]徐雙陽.桑黃多糖提取、分離純化及理化性質研究[D].杭州:浙江工業大學。2006.
來源:《食品科學》2010年第06期
作者:齊欣、張峻、陳穎、王昌祿
研究機構:1.食品營養與安全省部共建教育部重點實驗室,天津科技大學食品工程與生物技術學院,天津300457 2.天津市林業果樹研究所,天津300112
基金項目:天津市農業科學院院長基金
關鍵詞:桑黃;多糖;黃酮;三萜
Keyword: Phellinus linteus; polysaccharides ;flavonoids ;triterpenoids
山野小朱